Церковь Рождества Пресвятой Богородицы в Самборе широко известена тем, что в ней хранится самборская чудотворная икона Божьей Матери. Долгое время она была единственной в Украине коронованной иконой, то есть признанной и уважаемой Католической церковью. А вот о том, что в храме есть мощи Св. Валентина, как не удивительно, известно не многим.
В 1553 г., того времени владелица самборских земель, королева Бона позволила украинцам строить церковь в середине города, но еще долгое время поляки чинили разные препятствия, так как не хотели видеть здесь украинскую церковь. Но вопреки всему через некоторое время была возведена деревянная церковь Рождества Пресвятой Богородицы, которая служила украинцам аж до 1738 г. Именно тогда владельцы села Радлович Илья и Елена Комарницкие выделили средства на постройку новой мурованной церкви. Церковь построили возле старой деревянной.
Строительство новой мурованной церкви было завершено в 1738 г. (в некоторых источниках в 1737 г.). Храм являл собой форму креста с одним куполом, галереей и 10 окнами. Церковь поддавалась нескольким реставрациям и перестройкам (1841 г. и 1893 г.). В 1865 г. за алтарем была построена дугообразная сакристия, было перенесено главный алтарь, установлен иконостас с «вратами». Разрисовал церковь маляр — иконописец Яблонский. В 1894-1898 гг. свою лепту в декор церкви внес известный художник Корнило Устиянович. В храме есть иконы маляра А.Скрутка. В 1900 г. построен притвор, а над ним сделана терраса. В 1912 г. пристроены боковые нефы, заменены предсени на крыльцо и проведено электрическое освещение. В 1935 г. разрисовал церковь эмигрант с Украины художник Владимир (в других источниках Павел) Запорожский, а помогали ему самборские маляры братья Малании.
Запорожский провел консервацию некоторых настенных рисунков Корнила Устияновича, создал новые рисунки и обновил портреты фундаторов церкви Ильи и Елены Комарницких. В церкве была чудотворная икона Божьей Матери, которую передала в старую церковь в 1727 г. самборянка Елена Добрянская после того, как увидела что в иконе появляются слезы.
Чудотворную икону было торжественно короновано 28 августа 1928 г. Во время Второй мировой войны, а именно 20 июля 1944 г. икона была вывезена на Запад и место ее нахождение не известно. За другими ведомостями икона была спрятана в церкви. В конце 1996 г. отцы самборской церкви Рождества Пресвятой Богородицы передали на реставрацию в мастерскую львовского Музея истории религии древнюю икону. Реставратор Василий Бояновский в интервью корреспонденту газеты сказал: «Только после зондажа можно было более достоверно сказать, что эта икона конца XVII ст., которая известна под названием Самборской Богородицы Чудотворной».
После реставрации икона побывала в львовских и дрогобицких храмах, а 23 февраля 1997 г. закончились торжественности, связанные с возвращением чудотворной иконы в Самбор. Здесь прошел обход вокруг площади Рынок и установление иконы на отведенном для нее места в церкви Рождества Пресвятой Богородицы.
В разные времена в церкви было вмуровано 4 памятные таблицы. Так в 1898 г. — таблицу с белого мрамора в память о благодетельницы Петронели Ревакович (1823-1893), которая выделила средства на внешний ремонт храма. В 1908 г. установлено памятную плиту с черного мрамора парафияльному священнику о. Антону Щавинскому (1843-1907). Подобную таблицы с черного мрамора было установлено долголетнему священнику Францу Рабию (1860-1933). Эти две таблицы, к сожалению, было уничтожено во время советской власти. В 1939 г. в главном нефе справа замурованная черная мраморная таблица с основными вехами в истории церкви. На таблице высечено 8 дат истории храма.
С 1814 г. имеется упоминание о колокольне, что возле церкви. В 1893 г. колокольню отремонтировали и покрыли бляхой вместо гонта.
Интересный факт: в народе говорят, что жители Самбора целуются пылко как никто. А все потому, что в главном храме города — церкви Рождества Пресвятой Богородицы — уже 250 лет хранятся мощи покровителя влюбленных Св. Валентина. Подлинность реликвии подтверждает документ Папы Римского от 1759 г.